组织蛋白提取的一般步骤：
一、实验准备
1. 材料准备：新鲜组织样本、裂解液（含蛋白酶抑制剂和磷酸酶抑制剂）、匀浆器、离心机、冰盒、移液器等。
2. 试剂预冷：将裂解液置于冰上预冷，确保在提取过程中保持低温，以降低蛋白降解的风险。
二、组织处理
1. 清洗组织：将新鲜组织样本用预冷的生理盐水或 PBS 缓冲液轻轻冲洗，去除表面的血液和杂质。
2. 剪碎组织：用干净的剪刀或手术刀将组织剪碎成小块，以便后续匀浆操作。尽量保持组织块大小均匀，以提高匀浆效率。
三、匀浆
1. 将剪碎的组织放入匀浆器中，加入适量预冷的裂解液。裂解液的用量一般为组织重量的 5 - 10 倍。
2. 在冰上进行匀浆操作，可采用手动匀浆或机械匀浆的方式。手动匀浆时，需轻柔地上下研磨组织，避免产生过多热量；机械匀浆时，设置合适的转速和时间，确保组织充分匀浆。匀浆过程中要始终保持低温，防止蛋白降解。
四、离心
1. 将匀浆液转移至离心管中，在 4℃下以适当的转速离心一定时间，一般为 10000 - 15000 rpm 离心 10 - 20 分钟。
2. 离心后，匀浆液分为上清液和沉淀两部分。上清液中含有提取的组织蛋白，沉淀主要为细胞碎片和未破碎的组织。
五、收集蛋白
1. 用移液器小心地吸取上清液，转移至新的离心管中。避免吸取沉淀，以免污染蛋白样品。
2. 可将提取的蛋白样品分装保存于 -80℃冰箱中，避免反复冻融，以防止蛋白降解。
在整个提取过程中，要始终保持操作的无菌和低温条件，以确保提取的组织蛋白质量。同时，根据不同的实验需求和组织类型，可能需要对提取步骤进行适当的调整和优化。
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