封板膜相关技术文章 -MTT 实验检测细胞活性的步骤
以下是用 MTT 实验检测细胞活性的步骤：
一、实验准备
1. 材料准备：MTT 粉末、二甲基亚砜（DMSO）、细胞培养板、细胞、培养基、胰酶、酶标仪等。
2. 溶液配制：将 MTT 粉末溶解在 PBS 中，配制成 5mg/ml 的 MTT 溶液，过滤**后备用。
二、细胞培养与处理
1. 将细胞接种到 96 孔细胞培养板中，根据细胞类型和实验目的确定合适的接种密度，一般每孔接种 5000 - 10000 个细胞。
2. 将细胞置于 37℃、5% CO₂的培养箱中培养一段时间，让细胞贴壁并生长。
3. 根据实验设计，对细胞进行不同的处理，如加入**、转染质粒等。
三、MTT 加入与孵育
1. 待细胞处理结束后，每孔加入 20μl MTT 溶液，使终浓度为 0.5mg/ml。
2. 将培养板放回培养箱中继续孵育 4 小时，在此期间，MTT 被活细胞内的线粒体脱氢酶还原为不溶性的蓝紫色结晶甲臜（Formazan）。
四、溶解甲臜
1. 小心吸去孔内培养基，每孔加入 150μl DMSO，轻轻振荡培养板，使甲臜充分溶解。
五、检测与分析
1. 使用酶标仪在波长 570nm（或参考特定实验要求的波长）处测量各孔的吸光度值（OD 值）。
2. OD 值反映了活细胞的数量和活性，可通过比较不同处理组的 OD 值来评估细胞活性。处理组的 OD 值与对照组 OD 值的比值可以反映处理对细胞活性的影响程度。
注意事项：
1. MTT 具有一定毒性，操作时应戴手套，避免接触皮肤。
2. 加入 MTT 溶液和 DMSO 时要小心操作，避免产生气泡影响测量结果。
3. 孵育时间和温度应严格控制，以确保实验结果的准确性。
4. 实验应设置多个复孔和对照组，以减少误差。
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