流式细胞术分析细胞周期的实验步骤：
一、细胞准备
1. 收集细胞：将处于对数生长期的细胞用胰酶消化，离心收集。
2. 洗涤细胞：用 PBS 缓冲液洗涤细胞 2 次，离心去除上清液。
二、固定细胞
1. 加入预冷的 70%乙醇，于 -20℃固定过夜。
2. 离心收集细胞，用 PBS 缓冲液洗涤细胞 2 次。
三、染色
1. 加入含有 RNA 酶的碘化丙啶（PI）染液，室温避光染色 30 分钟。
四、流式细胞仪检测
1. 将染色后的细胞悬液用流式细胞仪检测，记录激发波长为 488nm 的红色荧光信号。
2. 分析细胞周期各时相的细胞比例，通常 G1 期、S 期和 G2/M 期在流式图上会呈现不同的峰形分布。
通过以上步骤，可以较为准确地分析细胞周期各阶段的细胞分布情况。
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