**组化技术(Immunohistochemistry,IHC),全称为**组织化学技术,是应用抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂(荧光素、酶、金属离子、同位素)显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质),对其进行定位、定性及定量的研究。该技术把**反应的特异性、组织化学的可见性巧妙地结合起来,借助显微镜(包括荧光显微镜、电子显微镜)的显像和放大作用,在细胞、亚细胞水平检测各种抗原物质(如蛋白质、多肽、酶、**、病原体以及受体等)。
**组化技术的主要过程包括:抗原的提取与纯化;**动物或细胞融合,制备特异性抗体(**球蛋白)以及抗体的纯化;将显色剂与抗体结合形成标记抗体;标本的制备;**细胞化学反应以及呈色反应;观察结果。
**组化技术近年来得到迅速发展,50年代还**于**荧光技术,50年代以后逐渐发展建立起高度敏感,且更为实用的**酶技术。其在生物医学研究中具有十分广泛的作用,涉及许多研究领域。例如:
• 确定细胞类型和形态:有些蛋白具有组织特异性,通过对其特异性抗体实施**组化染色,便能清楚显示此类细胞外形轮廓,在神经科学研究和肿瘤临床病理中显得尤为重要;
• 辨认细胞产物的来源:利用某些细胞产物为抗原,制备相应的抗体,对组织细胞实施**组化染色,以确定细胞产物的来源,如***细胞产生的各种**,大多数可用**组化染色技术辨认,据此可研究细胞的分泌功能及对***肿瘤作功能分类,检测分泌异位**的肿瘤等,了解细胞分化程度;
• 确定细胞的分化程度:不同的同一类细胞多表达不同的标志性蛋白,根据对这些不同蛋白的鉴定可确定细胞的分化程度,例如,神经上皮细胞的标志性蛋白是巢蛋白(nestin),当其分化为放射状胶质细胞时表达波形蛋白(vimentin),在神经元发生期分化为成神经细胞时则表达Ⅲβ神经微管蛋白(TUJl),成神经细胞分化为成熟的神经元时表达神经丝蛋白(neurofilament,NF);
• 追踪神经纤维束和它的投射区。
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