在选择荧光定量PCR(qPCR)封板膜时,需要考虑以下几个关键因素以确保实验的成功和结果的准确性:
1. 透光性:由于qPCR仪的光路检测通道通常位于上方,因此对封板膜的透光度要求较高。封板膜材质需要具有高透光性,以确保荧光信号的准确检测。
2. 荧光背景:封板膜应具有低自发荧光,以提高信噪比,避免对实验结果产生干扰。
3. 蒸发率:封板膜需要具有较低的蒸发率,以减少样品在反应过程中的蒸发。
4. 密闭性:封板膜需要具有良好的密闭性,以防止样品交叉污染和外部污染。
5. 材质和耐受温度:封板膜材质通常是聚丙烯,需要能够在PCR实验的高温条件下使用而不变形。工作温度范围通常需要覆盖-40°C至+120°C。
6. RNase & DNase-free:封板膜应无RNase和DNase酶活性,以避免对样品造成污染。
7. 操作便利性:封板膜应易于操作,不易卷曲,且在揭除时不会在板上留下残余粘胶。
选择荧光定量PCR封板膜时,应重点考虑透光性、荧光背景、蒸发率、密闭性、材质和耐受温度、无酶活性以及操作便利性等因素,以确保实验的准确性和可靠性。
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