PCR(聚合酶链式反应)中的重要组分有以下几种:
一、模板
1. 来源:可以是基因组 DNA、cDNA、质粒 DNA 等。
2. 作用:提供待扩增的特定核酸序列。
二、引物
1. 组成:通常是一段短的单链寡核苷酸序列,一般长度为 18-30 个核苷酸。
2. 作用:与模板 DNA 上的特定区域结合,确定扩增的起始和终止位置,引导 DNA 聚合酶合成新的 DNA 链。
三、DNA 聚合酶
1. 特性:具有热稳定性,能够在高温下不失活。常见的如 Taq DNA 聚合酶。
2. 作用:以单链 DNA 为模板,以 dNTP(脱氧核糖核苷三磷酸)为底物,按照碱基互补配对原则合成新的 DNA 链。
四、dNTP
1. 种类:包括 dATP、dTTP、dCTP、dGTP。
2. 作用:作为合成新 DNA 链的原料。
五、缓冲液
1. 成分:一般含有 Tris-HCl(提供稳定的 pH 环境)、KCl(促进引物退火)、MgCl₂(激活 DNA 聚合酶)等。
2. 作用:为 PCR 反应提供适宜的化学环境,维持反应体系的 pH 值、离子强度等条件稳定。
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