荧光定量 PCR(Polymerase Chain Reaction,聚合酶链式反应)技术是一种在 PCR 反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号实时监测整个 PCR 进程,*后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。
其工作原理是:在 PCR 反应体系中加入荧光染料或荧光标记的特异性探针。荧光染料能嵌入 DNA 双链,其荧光强度与 PCR 产物的数量成正比;荧光探针则与目标序列特异性结合,在 PCR 过程中被水解或与扩增产物结合而产生荧光信号。通过检测荧光信号的强度变化,可以实时反映 PCR 产物的量。
荧光定量 PCR 技术具有许多优点,包括:
1. 高灵敏度:能够检测到极少量的核酸样本。
2. 特异性强:通过设计特异性的引物和探针,可准确检测特定的靶序列。
3. 定量准确:能对核酸进行**定量。
4. 快速高效:整个检测过程相对较快,可在短时间内得到结果。
该技术广泛应用于医学诊断(如病原体检测、**基因诊断、肿瘤基因检测等)、生物学研究(基因表达分析、基因分型等)、农业科学(转基因检测、病虫害检测等)以及食品检测(微生物检测、转基因食品检测等)等领域。
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